革兰氏染色的结果及意义(革兰氏染色结果分析)
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2023-07-02
1.原理:革兰氏染色可以将所有细菌分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-),这是细菌学中最常用的差异染色方法。
2.这种染色方法之所以能将细菌分为G+菌和G-菌,是因为一般认为革兰氏染色是基于细菌细胞壁的特殊化学成分。
3.步骤:(1)将涂片固定在干净的载玻片中心,滴一滴蒸馏水,用接种环进行无菌操作,取少许培养物,放入载玻片的水滴中,与水混合制成菌悬液,涂成直径约1cm的薄层。
4.(2)染色向固定的涂片中加入草酸铵结晶紫染料溶液。染液要完全覆盖整个膜,染色1分钟。
5.(3)用水冲洗染色一定时间,握住载玻片使其成450°角,用小水流洗掉多余的染料,保持染料被细菌吸附。
(4)媒染,用碘溶液覆盖1分钟。
7.在媒染剂处理中,媒染剂与染料形成不溶性化合物,可增加染料与细菌的亲和力。
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8.(5)水洗,即用吸水纸吸水,用微小的水流慢慢洗去涂片上的染料溶液,用吸水纸吸干。
9.(6)加入几滴95%的酒精脱色,轻轻摇动脱色,20s ~ 30s后再用清水冲洗吸收水分。
10.(7)用藏红花染料溶液双重染色10 s后,用自来水冲洗。
11.(8)干燥后镜检和染色结果显示,革兰氏阳性反应菌均为紫色,阴性反应菌均为红色。
12.膨胀的数据样本在干燥后被固定。固定的目的有三:(1)杀灭微生物,固定细胞结构。
13、(2)保证细菌能更牢固地附着在载玻片上,防止标本在冲洗时被水冲走。
14.(3)改变染料对细胞的渗透性,因为死原生质比活原生质更容易染色。
15.参考资料来源:百度百科-革兰氏染色法参考资料来源:百度百科-革兰氏染色。