质粒的概念和医学意义(质粒的概念及主要特征)
1991
2023-11-16
1.质粒是一种能在真核细胞的细胞核外或原核生物的亲核区域外自主复制的遗传单位,包括真核细胞细胞器(主要是线粒体和叶绿体)和细菌细胞亲核区域外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子。
2.现在习惯上用来指除细菌(大肠杆菌)、酵母和放线菌等生物体的细胞核或假核中的DNA以外的DNA分子。
3.在基因工程中,质粒常被用作基因的载体。
4.许多细菌除了假核中的DNA外,还有大量的小环状DNA分子,称为质粒(补充:有些质粒是RNA)。
5.质粒上常带有抗生素抗性基因,如四环素抗性基因或卡那霉素抗性基因。
6.有些质粒被称为游离体。这些质粒可以整合到细菌的染色体中,也可以从整合的位置被切断,成为游离于染色体之外的DNA分子。
7.目前已发现数百种具有质粒的细菌,已知的细菌质粒大多为闭合环状DNA分子(简称cccDNA)。
8.细菌质粒的相对分子量一般较小,约为细菌染色体的0.5% ~ 3%。
9.根据相对分子量,质粒大致可分为两类:较大类的相对分子量在40×106以上,较小类的相对分子量在10×106以下(少数质粒的相对分子量介于两者之间)。
10.每个细胞中质粒的数量主要取决于质粒本身的复制特性。
11.根据复制的性质,质粒可分为两种:一种是致密质粒,细胞染色体复制一次,质粒复制一次,每个细胞只有1 ~ 2个质粒;另一类是松弛质粒,染色体复制停止后可以继续复制,一般每个细胞有20个左右的质粒。
12.这些质粒的复制受宿主细胞的松弛控制,每个细胞含有10-200个拷贝。如果宿主蛋白的合成被某些药物抑制,质粒拷贝数会增加到几千个。
13.例如,较早的质粒pBR322属于松弛质粒,只有经过氯霉素处理才能达到较高的拷贝数。
14.一般分子量大的质粒属于严格型。
15.小分子量的质粒属于松弛型。
16.质粒的复制有时与其宿主细胞有关。一些质粒在大肠杆菌中的复制是紧密的,而在变形杆菌中是松弛的。
17.在基因工程中,经常使用人工构建的质粒作为载体。
18.人工构建的质粒可以整合多种有用的特征,例如包含多种单一限制性位点和抗生素抗性。
19.常用的人工质粒载体是pBR322和pSC101。
20.pBR322含有四环素抗性基因(Tcr)和氨苄青霉素抗性基因(Apr),并含有五种内切酶。
21.如果将DNA片段插入EcoRI,两个抗生素基因的表达不会受到影响。
22.然而,如果将DNA片段插入Hind III、Bam H I或Sal I,四环素抗性基因将失活。
23.此时,含有DNA插入片段的pBR322会使宿主菌对氨苄青霉素产生抗性,但对四环素敏感。
24.没有DNA插入物的pBR322将使宿主细菌对氨苄青霉素和四环素都有抗性,而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感。
25.pSC101与pBR322相似,只是没有氨苄青霉素抗性基因和PstI切割点。
26.质粒载体最大插入片段约为10 kb(kb表示千碱基对)。
27.质粒是一种能在真核细胞的细胞核外或原核生物的亲核区域外自主复制的遗传单位,包括真核细胞细胞器(主要是线粒体和叶绿体)和细菌细胞亲核区域外的环状脱氧核糖核酸(DNA)分子。
28.现在习惯上用来指除细菌(大肠杆菌)、酵母和放线菌等生物体的细胞核或假核中的DNA以外的DNA分子。
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各位朋友大家好,常识网编辑在此为各位朋友解答以上问题。质粒的概念,质粒这个很多人还不知道,现在让我们往下说吧!
29.在基因工程中,质粒常被用作基因的载体。
30.许多细菌除了假核中的DNA外,还有大量的小环状DNA分子,称为质粒(补充:有些质粒是RNA)。
31.质粒上常带有抗生素抗性基因,如四环素抗性基因或卡那霉素抗性基因。
32.有些质粒被称为游离体。这些质粒可以整合到细菌的染色体中,也可以从整合的位置被切断,成为游离于染色体之外的DNA分子。
33.目前已发现数百种具有质粒的细菌,已知的细菌质粒大多为闭合环状DNA分子(简称cccDNA)。
34.细菌质粒的相对分子量一般较小,约为细菌染色体的0.5% ~ 3%。
35.根据相对分子量,质粒大致可分为两类:较大类的相对分子量大于40×106,较小类的相对分子量小于10×106(少数质粒介于两者之间)。
36.每个细胞中质粒的数量主要取决于质粒本身的复制特性。
37.根据复制的性质,质粒可分为两种:一种是严格质粒,细胞染色体复制一次,质粒复制一次,每个细胞只有1 ~ 2个质粒;另一类是松弛质粒,染色体复制停止后可以继续复制,一般每个细胞有20个左右的质粒。
38.这些质粒的复制受宿主细胞的松弛控制,每个细胞含有10-200个拷贝。如果宿主蛋白的合成被某些药物抑制,质粒拷贝数会增加到几千个。
39.例如,早期的质粒pBR322属于松弛质粒,它必须用氯霉素处理以获得更高的拷贝数。
40.一般分子量大的质粒属于严格型。
41.小分子量的质粒属于松弛型。
42.质粒的复制有时与其宿主细胞有关。一些质粒在大肠杆菌中的复制是紧密的,而在变形杆菌中是松弛的。
43.在基因工程中,经常使用人工构建的质粒作为载体。
44.人工构建的质粒可以整合多种有用的特征,例如包含多种单一限制性位点和抗生素抗性。
45.常用的人工质粒载体是pBR322和pSC101。
46.pBR322含有四环素抗性基因(Tcr)和氨苄青霉素抗性基因(Apr),并含有五种内切酶。
47.如果将DNA片段插入EcoRI,两个抗生素基因的表达不会受到影响。
48.然而,如果将DNA片段插入Hind III、Bam H I或Sal I的切割点,四环素抗性基因将失活。
49.此时,含有DNA插入片段的pBR322会使宿主菌对氨苄青霉素产生抗性,但对四环素敏感。
50.没有DNA插入物的pBR322将使宿主细菌对氨苄青霉素和四环素都有抗性,而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感。
51.pSC101与pBR322相似,只是没有氨苄青霉素抗性基因和PstI切割点。
52.质粒载体最大插入片段约为10 kb(kb表示千碱基对)。
53.质粒是附着在原始非细胞染色体或核DNA上的小DNA分子(即细胞附着颗粒或细胞附着颗粒)。
54.虽然大多数质粒的构型是环状的,但目前发现少数质粒的构型是线性的,存在于细菌、酵母等多种生物中,甚至存在于植物的线粒体等细胞器中。
55.质粒是附着在原始非细胞染色体或细胞核DNA上,能自主复制的DNA小分子(即细胞附着颗粒或细胞附着颗粒)。
56.虽然大多数质粒的构型是环状的,但目前发现少数质粒的构型是线性的,存在于细菌、酵母等多种生物中,甚至存在于植物的线粒体等细胞器中。